Post by jone447 on Aug 2, 2023 1:54:34 GMT -5
烈的核定位，而 LDL 负载则具有相反的效果。逆的，且不改变 TIAL1 表达水平。然而，甾醇的消耗或积累n) 对 RNA 进行 DNase I 处理。使用高容量 cDNA 逆转录试剂盒（Applied Biosystems）对 RNA 进行逆转录。在 LC480 II Lightcycler (Roche) 中并使用基因特异性引物和 Sybr Fast 2x Universal Master mix (Kapa) 进行定量 PCR。结果标准化为 36B4 或肌动蛋白 mRNA 水平。用
于 qPCR 的引物如补充表1所示 。用于 RNA 测序的样品亚洲手机号码列表使用 RNeasy 柱（QIAGEN，#74104）进一步纯化。使用 Agilent 2100 生物分析仪对所有样品进行 RNA 完整性分析。对于 RNA 测序，使用标准方法，使用 Illumina 的 TruSeq mRNA 文库制备试剂盒构建 cDNA 文库制备，并在苏黎世功能基因组中心 (FGCZ) 的 Novaseq 6000 平台
上进行测序。分析了每个基因型（WT 和 Tial1 LKO）3 个个体肝脏的结果。 肝脏甘油三酯和胆固醇含量 使用 TissueLyser II (Qiagen) 匀浆组织，用 1 ml 己烷:异丙醇 (3:2) 提取 50 mg 肝脏中的脂质。将裂解物以 20,000 g 离心 3 分钟，并将上清液转移至新管中。用0.5ml己烷:异丙醇重新提取沉淀，再次旋转并合并上清液。0.5 ml 体积的 0.5 M Na 2 SO 4添